Hepatit C bir və ya bir neçə RNT molekulundan ibarət olan Flaviviridae HCV virusunun səbəb olduğu qaraciyər infeksiyasıdır. Bir qayda olaraq, xəstədə hepatit C qurmaq üçün bir sıra diaqnostik tədbirlər həyata keçirilir. PCR diaqnozu dəqiq təsdiqləyən bir analizdir. Çox vaxt nəticə həkimlər tərəfindən xəstədə artıq xəstəliyin ilk əlamətləri olduqda verilir.
Hepatit C nədir
Qan və ya cinsi əlaqə yolu ilə keçən virus infeksiyası ilə qaraciyərin zədələnməsi tibbdə hepatit C adlanır. Təbbüs törədicisi Flaviviridae ailəsinin hüceyrə olmayan infeksion agentlərinin RNT tərkibli virusudur. İnfeksiya özünü göstərmədən uzun müddət bədəndə qala bilər. Buna görə də, yalnız PCR RNT RNT istifadə edərək qan testindən istifadə edərək mikroorqanizm aşkar edildikdə, hepatit C (diaqnoz kimi) əsaslandırılmış hesab olunur.
Flavivirus süni şəkildə yetişdirilmiş təcrid olunmuş hüceyrələrdə istehsal olunmur. Çoxalma prosesində yoluxucu agent immunoloji cəhətdən fərqli modifikasiyalar yaradır. Bu amillər orqanizmin verməsini maneə törədirmüvafiq qoruyucu reaksiya və mütəxəssislər effektiv peyvənd hazırlamaqda çətinlik çəkirlər.
Virus parenteral yolla ötürülür. İnfeksiya üçün o, kifayət qədər miqdarda birbaşa qan dövranına daxil olmalıdır.
Hepatit C üçün hansı testlər edilir
Qaraciyərin virus patologiyaları laborator müayinələrdən istifadə etməklə müəyyən edilir. Hepatit C-nin kliniki tədqiqatları xəstənin biomaterialında, əsasən qanda olan yad və təhlükəli antigenlərin və ya zülal birləşmələrinin (antikorların) öyrənilməsi ilə aparılır.
- Enzimatik immunoanaliz (ELISA). Metod qanda lgM antikorlarının aşkarlanmasına əsaslanır. İmmunoqlobulin ən böyük hesab olunur və pentamerdir. O, lenfositlərin naməlum yad maddəyə ilkin qoruyucu reaksiyasında özünü göstərir.
- Radioimmunoassay (RIA) - yodun etiketli radioaktiv izotopundan istifadə etməklə lgM immunoqlobulinin kəmiyyət təyini.
- Hepatit C-nin PCR - biomaterialda (qanda) viral RNT-nin təyini. Bu analiz diaqnozu etibarlı şəkildə təsdiqləyir.
IgG testi etibarlı deyil. Onun qan zərdabında olması təkcə flavivirusun deyil, həm də eyni patogenə malik olan başqa bir keçmiş infeksiyanın olduğunu göstərə bilər.
PCR analizini nə müəyyənləşdirir
Polimeraza zəncirvari reaksiya (PZR) tədqiqat üçün material nümunələrində (epitelium, qan) müəyyən patogenlər üçün spesifik DNT bölgələrinin müəyyən edilməsinə əsaslanır. Təhlil bioloji materialda onların RNT və ya DNT-sini aşkar etməklə patogen ən kiçik orqanizmləri (virusları) müəyyən etməyə imkan verir.
Hepatit C anticisimlərinin aşkarlanması üçün laboratoriya proseduru PCR 3 mərhələdə aparılır:
- Seçin. Tədqiq olunan biomaterial çirklərdən təmizlənir və DNT xromatoqrafik sütunun mobil fazasında əldə edilir.
- Gücləndirmə. Təhlil cihaz-termostat dövrəsində aparılır. Sınaq borularını müəyyən dövriyyə ilə qızdırır və soyudur. Bir tədqiqat üçün 35 dövrə qədər həyata keçirilir. Nəticə patogeni aşkar etmək, müəyyən etmək və qiymətləndirmək üçün kifayət qədər sayda DNT fraqmentidir.
- Elektroforez. Alınan fraqmentlər agaroza müxtəlif doymuş gelə yerləşdirilir və elektroforez aparılır. Nəticədə alınan elektroferoqram kompüterdə təhlil edilir.
Təkcə standart PCR tədqiqatı deyil, həm də Real Time PCR analizi istifadə olunur. Bu real vaxt diaqnostikasıdır. Metod keyfiyyət və kəmiyyət təhlilinə imkan verir ki, bu da xəstəliyin formalaşması və dinamikasını müəyyən etməyə, həmçinin patologiyanın mənşəyinin səbəbini aradan qaldırmağa yönəlmiş terapiya təyin etməyə imkan verir. Real vaxt rejimində PCR yoluxucu agentlərin təmiz kulturasını (genotipləşdirmə) müəyyən etmək üçün də istifadə olunur.
Polimeraza zəncirvari reaksiya testi necə aparılır
Diaqnoz üçün istənilən insan bioloji mayesindən istifadə edilə bilər. Hepatit C üçün test üçün biomaterial adətən qandır.
Diaqnostika üçün nümunə götürülməsi prosedur qaydasında həyata keçirilirofis. Qan almaq üçün qanın laxtalanmasını maneə törədən maddə olan birdəfəlik sınaq borularından istifadə edin. Yoluxucu agentlərin yayılmasının qarşısının alınmasına yönəlmiş fəaliyyətlər kənardan başqa mikroorqanizm ştammının daxil olmasının qarşısını almağa kömək edir.
Hepatit C-nin PCR üçün qan səhər acqarına alınır. Nümunə dərhal laboratoriyaya göndərilir. Biomaterialın +4 ilə +8 dərəcə Selsi temperaturunda saxlanmasına icazə verilir. Konteynerlər etiketlənir və təlimatlarla təmin edilir. Test nəticələri 48 saat ərzində, bəzən daha tez əldə edilə bilər.
PCR növləri
Polimeraza zəncirvari reaksiyasının tətbiq dairəsi kifayət qədər genişdir. İnfeksionistlər PCR hepatit B, qan əmici həşəratlar tərəfindən ötürülən xəstəliklər, QİÇS, vərəmdən istifadə edərək təyin edirlər. Onkologiyada bu üsuldan istifadə etməklə şiş hüceyrələri erkən mərhələdə aşkarlanır.
Təxminən on dörd növ analiz var. Bu və ya digər növün istifadəsi təhlillərin həcmindən və yekun nəticələrindən asılıdır. Nəticə 20 dəqiqə ərzində lazım olduqda bəzi PCR növləri əvəzolunmazdır.
Hepatit C-nin diaqnozu üçün 3 növ polimeraza zəncirvari reaksiya istifadə olunur:
- Keyfiyyətli qiymətləndirmə orqanizmdə infeksiyanın olduğunu göstərən müsbət və ya flavivirusun olmadığını göstərən mənfi ola bilər.
- Real-time PCR (kəmiyyət analizi) - patogenin kəmiyyət RNT-ni IU/ml-də müəyyən edir.
- Genotipləşdirmə virusun növünü (genotipini) aşkar edən analizdir.
Xəstəliyi dəqiq müəyyən etmək və təyin etmək, ardıncaoptimal terapiya təyin etmək üçün hər üç tədqiqat növü istifadə olunur.
Keyfiyyətli polimeraza zəncirvari reaksiya analizi
HCV-yə qarşı antikor aşkar edən ELISA testi olan hər kəs üçün analiz məcburidir. Hepatit C üçün keyfiyyətli PCR standart həssaslıq testidir. Metod yalnız aşkarlamağa yönəlib, digər maddələrin hesablanması və ya təcrid edilməsi aparılmır.
Antikorları aşkar etmək üçün həssaslıq həddi ən azı 50 IU/ml olan xüsusi test sistemlərindən istifadə edilir. Antikorlar aşkar edilərsə, digər aydınlaşdırıcı testlər təyin edilir. Nəticə mənfi olarsa, əlavə sınaq aparılmayacaq.
Bəzi hallarda yanlış mənfi nəticə səriştəsiz laboratoriya işçiləri və ya keyfiyyətsiz reagentlər səbəbindən ola bilər. Sığorta üçün analizi başqa yerdə təkrar etmək daha yaxşıdır.
Kəmiyyət PCR
Metod bir reaksiya dövründə flavivirusların sayını birbaşa öyrənmək üçün istifadə olunur. Dəqiq ölçmə üçün hibridləşmə üçün istifadə edilən DNT fraqmentləri və ya floresan etiketli primerlər istifadə olunur. SYBL Yaşıl boyadan istifadə edərək qənaətcil aşkarlama variantı var. Boya DNT-də kiçik bir oluğa yapışdırılır və lazerlə şüalandıqda mavi rəngə çevrilir.
Konsentrasiya rəqəmsal ekvivalentdə aparat-gücləndirici tərəfindən müəyyən edilir. Dəyərlər laboratoriyalar arasında bir qədər fərqli ola bilər və buna görə də istinad dəyərləri ilə müqayisə edilməlidir.
Kəmiyyət PCRhepatit C dərmanların optimal dozasını seçməyə və terapiyanın müddətini təyin etməyə kömək edir. Tədqiqatın tezliyi xəstəliyin mərhələsindən, genotip növündən və təyin edilmiş müalicə kursundan asılıdır.
Genotip təyini
Hepatit C virusu dəyişkən genetik quruluşa malikdir. Çoxsaylı dəyişikliklər peyvəndin yaradılmasını qeyri-mümkün edir, həmçinin terapiyanı çətinləşdirir. Ümumilikdə 11 genotip və 100 alt tip müəyyən edilmiş və qeydə alınmışdır. Keçmiş SSRİ ölkələrində hepatit C-yə yoluxmuş şəxslərdə PCR əsasən 1b və 3 genotiplərini aşkar edir.
Genotiplərdən hər hansı birinin varlığında, siroz və ya qaraciyər xərçəngi əylənə bilər. Bu səbəbdən virusu vaxtında aşkar etmək çox vacibdir.
Bəzi xəstələr üçün HCV ilə mübarizə üçün nəzərdə tutulmuş bəzi dərmanlar zəhərlidir. Genotipləmə zülalın növünü təyin etməyə və effektiv dərman təyin etməyə imkan verir.
Yazma testlərinin nəticələrində virusun genotipini göstərən kiçik latın hərfi olan rəqəm var. HCV aşkar edilibsə, lakin yazılmayıbsa, bu o deməkdir ki, insanın müəyyən coğrafi ərazi üçün xarakterik olmayan genotipi var.
Analiz nəticələri
Həkim nəticələrin deşifrə edilməsi ilə məşğul olur. Yalnız bir neçə tədqiqatın məlumatları (anamnez və müayinə ilə birlikdə) xəstəlik tarixinin ümumi real mənzərəsini verə bilər.
- Sağlam insanda biomaterialda keyfiyyət reaksiyasının yoxlanılması heç nə aşkar etmir. Dəyər "aşkar" göstərilirsə, infeksiya təsdiqlənir və xəstəəlavə diaqnoz, ardınca müalicə lazımdır.
- İnfeksion agentlərin sayının müəyyən edilməsi orqanizmə virus yükünü qiymətləndirməyə imkan verir. Normalda hepatit C kəmiyyət PCR patogeni aşkar etmir. 810^5-ə qədər olan bir göstərici aşağı yük kimi qəbul edilir və düzgün terapiya ilə əlverişli nəticəyə zəmanət verir. Daha yüksək dəyərlər dərin müayinə və uzunmüddətli terapiyanın təyin edilməsini tələb edir, müsbət nəticəyə heç kim zəmanət verə bilməz.
- Müsbət genotipləşdirmə nəticələri hansı genotipin tanındığını göstərir. Mənfi nəticə ya flavivirusun olmadığını, ya da bu bölgə üçün xarakterik olmayan genotipin olduğunu göstərir.
Müsbət PCR testi nəyi göstərir
Hər hansı ciddi xəstəlik hərtərəfli diaqnoz tələb edir. Müsbət hepatit C PCR diaqnozu təsdiqləyir, lakin proqnozlar yalnız əlavə laboratoriya və instrumental tədqiqatlardan sonra verilə bilər.
Virusun aşkarlanması patologiyanın tam təsvirini vermir. Onun növünü və xarakterini müəyyən etmək, qaraciyərə və digər orqanlara necə təsir etdiyini müəyyən etmək lazımdır. HCV-nin erkən aşkarlanması çox vaxt əlverişli terapevtik nəticə verir.
Müsbət ELISA ilə mənfi PCR
Qaraciyərin zədələnməsi üçün xarakterik olan simptomları müşahidə etdikdə infeksiyanın artıq orqanizmə daxil olması ehtimalı yüksəkdir. Buna görə bir hepatoloq və ya bir yoluxucu xəstəlik mütəxəssisi ilə əlaqə saxlamalısınız. Müsahibələr zamanı mütəxəssis anamnez toplayacaq və lazımi müayinəni təyin edəcək.
Əgərhepatit C PCR ilə bağlı tədqiqatların nəticələri mənfidir və ferment immunoassay müsbətdir, bu qanda flavivirusa qarşı antikorların olduğunu göstərir. Bu, adətən, infeksiya bədənə az miqdarda daxil olduqda baş verir, buna görə də immunitet sistemi bununla öz başına mübarizə aparır. Amma belə insanlar hələ də yoluxmuş sayılırlar və hər 6 aydan bir müayinədən keçmək tələb olunurlar. Əgər belə analiz nəticələri ilə bir şəxs pulsuz tibbi müayinədən imtina edərsə, sağlamlığını qorumaq üçün pullu bir PCR aparmaq daha yaxşıdır və nəticələr müsbət olarsa, diaqnoz və müalicə üçün bir mütəxəssislə əlaqə saxlayın.
Metodun üstünlükləri və mənfi cəhətləri
Hepatit C diaqnozu qoyularkən PCR bir sıra üstünlüklərə malikdir:
- Patogenin erkən aşkarlanması.
- Virusun dəqiq tərifi.
- Diaqnostikanın effektivliyi.
- Minimum xəta dərəcəsi.
- Yüksək həssaslıq.
Metodun çatışmazlıqları:
- Təhlilin yüksək qiyməti. Test üçün bahalı avadanlıq, reagentlər və yüksək ixtisaslı tibbi heyət tələb olunur. Hamısı birlikdə xeyli miqdarda əlavə edir.
- Biomaterialın daşınması üçün ciddi tələblər.
Qaraciyərin iltihabının müalicəsi
Hepatit C virusu üçün PCR analizi diaqnoz üçün əsas hesab edilir, lakin qəti deyil. Terapiyanın effektiv olması üçün bir sıra əlavə laboratoriya və instrumental tədqiqatlar tələb olunur. Hamısını keçdikdən sonradiaqnostik tədbirlər həkim müalicəni təyin edir:
- Pəhriz 5 təyin olunur.
- Alkoqol tamamilə istisnadır.
- İnterferon və Ribavirinin 25 gün birgə qəbulu.
- Hepaprotektor kursları "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- Xüsusi hallarda diskret plazmaferez istifadə olunur.
Hepatoloqun təyin etdiyi dərmanlar, dozası dəyişdirilmədən müntəzəm olaraq istifadə olunur. Dərman qəbulunun müddəti nəzarət testlərindən keçdikdən sonra həkim tərəfindən müəyyən edilir. Terapiya kursunu bitirdikdən sonra altı aydan bir həkimə baş çəkməlisiniz.
PZR-diaqnostikası hepatit C-nin törədicisini erkən mərhələdə müəyyən etməyə imkan verir. Bu, terapiyanın effektivliyinə və xəstəliyin siroz və hepatoselüler karsinoma kimi təhlükəli formalara keçməsinin qarşısını almağa kömək edir.
