Bakteriyaların öyrənilməsi insanlar üçün böyük praktik əhəmiyyətə malikdir. Bu günə qədər bir-birindən patogenliyi, yayılma sahəsi, forması, ölçüsü, bayraqcıqlarının sayı və digər parametrləri ilə fərqlənən çoxlu sayda prokariotlar aşkar edilmişdir. Bu ştammı ətraflı öyrənmək üçün bakterioloji tədqiqat metodundan istifadə edilir.
Bakteriya hüceyrələrinin analizi üçün hansı üsullar var?
Bakteriyaların patogen olub-olmadığını müəyyən etmək üçün kultura müxtəlif üsullarla araşdırılır. Onların arasında:
1. Bakterioskopik üsul.
2. Bakterioloji üsul.
3. Bioloji üsul.
Bakterioskopik və bakterioloji tədqiqat metodları bilavasitə prokaryotik hüceyrələrlə işə əsaslanır, o zaman belə hüceyrələrin eksperimental heyvanların canlı orqanizminə təsirini öyrənmək üçün bioloji analiz tələb olunur. Xəstəliyin müəyyən əlamətlərinin təzahür dərəcəsinə görə alim edə bilərnümunədə patogen bakteriyaların olması və ya olmaması haqqında nəticə, habelə onların mədəniyyətini əldə etmək və digər işlərdə istifadə etmək üçün heyvanın orqanizmində təbii şəkildə çox altmaq.
Tədqiqatın bakterioloji üsulu bakterioskopikdən fərqlənir. Birincidə canlı prokariotların xüsusi hazırlanmış kulturasından analiz üçün istifadə olunur, ikincisində isə şüşə slaydda ölü və ya canlı hüceyrələrlə iş aparılır.
Bakterioloji tədqiqat metodunun mərhələləri. Mikrobiologiya
Bakteriya kulturasının xassələrinin öyrənilməsi prinsipi həm prokaryotik hüceyrələrin öyrənilməsini qarşısına məqsəd qoyan mikrobioloqlar, həm də vəzifəsi bakteriyaların patogen və ya qeyri-patogenliyini müəyyən etmək olan laboratoriya texnikləri üçün faydalı ola bilər. sonra xəstəyə diaqnoz qoyun.
Bakteriyaların öyrənilməsi üsulu üç mərhələyə bölünür:
1. Orijinal nümunədən bakteriyaların təcrid edilməsi.
2. Bakteriyaların əkilməsi və təmiz kulturanın yetişdirilməsi, onun xassələrinin öyrənilməsi.
3. Bakteriya hüceyrələrinin ətraflı tədqiqi.
Birinci mərhələ
Nümunə və ya yaxma mühitin sərbəst səthindən və ya xəstədən götürülür. Beləliklə, bir qida mühitinə səpilməli olan bir çox bakteriya növünün "kokteyli" alırıq. Bəzən lazım olan bakteriyaların orqanizmdə yayılma ocaqlarını bilməklə onları dərhal təcrid etmək mümkün olur.
İki və ya üç gündən sonra istədiyiniz koloniyalar seçilir vəSteril ilmənin köməyi ilə Petri qablarının bərk mühitinə səpilir. Bir çox laboratoriyalar bərk və ya maye qida mühiti ola bilən sınaq boruları ilə işləyir. Mikrobiologiyada bakterioloji tədqiqat metodu belə həyata keçirilir.
İkinci mərhələ
Bakteriyaların ayrı-ayrı koloniyaları alındıqdan sonra birbaşa makro və mikroanaliz aparılır. Koloniyaların bütün parametrləri ölçülür, hər birinin rəngi və forması müəyyən edilir. Petri qabında, sonra isə başlanğıc materialda koloniyaları saymaq qeyri-adi deyil. Bu, patogen bakteriyaların analizində vacibdir, onların sayı xəstəliyin dərəcəsindən asılıdır.
2-ci mərhələ mikroorqanizmlərin ayrı-ayrı koloniyalarını öyrənməkdən ibarət olan bakterioloji tədqiqat metodu bakteriyaların təhlili üçün bioloji üsulla əlaqələndirilə bilər. Bu mərhələdə işləməyin digər məqsədi mənbə materialının miqdarını artırmaqdır. Bu, qida mühitində edilə bilər və ya canlı eksperimental orqanizmlər üzərində in vivo təcrübə keçirə bilərsiniz. Patogen bakteriyalar çoxalacaq və nəticədə qanda milyonlarla prokaryotik hüceyrə olacaq. Alınan qandan bakteriyaların lazımi iş materialını hazırlamaq asandır.
Üçüncü mərhələ
Tədqiqatın ən mühüm hissəsi bakterial kulturanın morfoloji, biokimyəvi, toksigenik və antigenik xüsusiyyətlərinin müəyyən edilməsidir. İş qida mühitində əvvəlcədən təmizlənmiş kulturalarla, həmçinin mikroskop altında preparatlarla (tez-tez ləkələnmiş) aparılır.
Sahibliyi təyin edinpatogen və ya fürsətçi bakteriyaların bu və ya digər sistematik qruplara, habelə onların dərmanlara qarşı müqavimətini müəyyən etməyə bakterioloji tədqiqat metodu imkan verir. Mərhələ 3 - antibiotiklər, yəni ətraf mühitdə dərmanların məzmunu şəraitində bakterial hüceyrələrin davranışının təhlili.
Kulturanın antibiotiklərə davamlılığının öyrənilməsi konkret xəstə üçün zəruri, ən əsası isə təsirli dərman preparatlarının təyin edilməsi lazım olduqda böyük praktik əhəmiyyət kəsb edir. Burada bakterioloji tədqiqat metodu kömək edə bilər.
Böyümə mühiti nədir?
İnkişaf və çoxalma üçün bakteriyalar əvvəlcədən hazırlanmış qida mühitində olmalıdır. Konsistensiyaya görə onlar maye və ya bərk, mənşəyinə görə isə bitki və ya heyvan ola bilər.
Əsas media tələbləri:
1. Sterillik.
2. Maksimum şəffaflıq.
3. Turşuluğun, osmotik təzyiqin, suyun aktivliyinin və digər bioloji dəyərlərin optimal göstəriciləri.
Təcrid olunmuş koloniyaların əldə edilməsi
1. Drygalsky üsulu. Bu, bakterial döngəyə müxtəlif növ mikroorqanizmlər olan bir smear tətbiq edilməsindən ibarətdir. Bu döngə qida mühiti ilə ilk Petri qabı boyunca keçirilir. Bundan əlavə, döngə dəyişdirilmədən, qalıq material üsulu ikinci və üçüncü Petri qablarında aparılır. Beləliklə, koloniyanın son nümunələrində bakteriyalar çox sıx səpilməyəcək və bununla da iş üçün lazım olanları tapmaq qabiliyyətini asanlaşdıracaqdır.bakteriyalar.
2. Koch üsulu. O, ərimiş qida mühiti olan sınaq borularından istifadə edir. Orada bakteriya ləkəsi olan bir döngə və ya pipet yerləşdirilir, bundan sonra sınaq borusunun tərkibi xüsusi bir boşqaba tökülür. Agar (və ya jelatin) müəyyən müddətdən sonra bərkiyir və onun qalınlığında istənilən hüceyrə koloniyalarını tapmaq asandır. Mikroorqanizmlərin konsentrasiyasının çox yüksək olmaması üçün işə başlamazdan əvvəl sınaq borularındakı bakteriyaların qarışığını sulandırmaq vacibdir.
Mərhələləri istədiyiniz bakteriyalar kulturasının təcridinə əsaslanan bakterioloji tədqiqat metodu təcrid olunmuş koloniyaları tapmaq üçün bu iki üsul olmadan edə bilməz.
Antibioqram
Vizual olaraq bakteriyaların dərmanlara reaksiyasını iki praktik şəkildə görmək olar:
1. Kağız disk üsulu.
2. Maye mühitdə bakteriya və antibiotik yetişdirilir.
Kağız disk üsulu bərk qidalı mühitdə yetişdirilmiş mikroorqanizmlərin kulturasını tələb edir. Belə bir mühitə antibiotiklərlə isladılmış bir neçə ədəd yuvarlaq kağız qoyun. Dərman bakteriya hüceyrələrinin zərərsizləşdirilməsi ilə uğurla mübarizə aparırsa, bu cür müalicədən sonra koloniyalardan məhrum olan bir sahə olacaqdır. Antibiotikə reaksiya mənfi olarsa, bakteriyalar sağ qalacaq.
Maye qidalı mühitdən istifadə edildikdə, əvvəlcə müxtəlif qatılmalara malik bakteriyaların kulturası ilə bir neçə sınaq borusu hazırlayın. Bu sınaq borularına antibiotiklər əlavə edilir və gün ərzində maddə ilə mikroorqanizmlər arasında qarşılıqlı təsir prosesi müşahidə olunur. Nəticədə, yüksək keyfiyyətli bir antibioqram əldə edilir, ona görə də mümkündürmüəyyən bir məhsul üçün dərmanın effektivliyini qiymətləndirin.
Təhlilin əsas vəzifələri
Burada bakterioloji tədqiqat metodunun məqsədləri və mərhələləri sadalanır.
1. Bakterial koloniyaları təcrid etmək üçün istifadə ediləcək başlanğıc materialı əldə edin. Bu, hər hansı bir cismin səthindən, selikli qişadan və ya insan orqanının boşluğundan yaxma, qan testi ola bilər.
2. Bərk qida mühitində mədəniyyətin becərilməsi. 24-48 saatdan sonra Petri qabının üzərində müxtəlif növ bakteriyaların koloniyalarına rast gəlmək olar. Biz morfoloji və/yaxud biokimyəvi meyarlara uyğun olaraq istədiyinizi seçirik və onunla sonrakı işi həyata keçiririk.
3. Yaranan mədəniyyətin yayılması. Bakterioloji tədqiqat metodu bakterial mədəniyyətlərin sayını artırmaq üçün mexaniki və ya bioloji üsula əsaslana bilər. Birinci halda, iş bərk və ya maye qida mühiti ilə aparılır, bunun üzərində bakteriyalar bir termostatda çoxalır və yeni koloniyalar əmələ gətirir. Bioloji üsul bakteriyaların sayını artırmaq üçün təbii şərait tələb edir, buna görə də burada eksperimental heyvan mikroorqanizmlərə yoluxur. Bir neçə gündən sonra qan nümunəsində və ya yaxmada çoxlu prokaryotlar aşkar edilə bilər.
4. Təmizlənmiş mədəniyyətlə işləmək. Bakteriyaların sistematik mövqeyini, həmçinin patogenlərə aidiyyətini müəyyən etmək üçün hüceyrələrin morfoloji və biokimyəvi xüsusiyyətlərinə görə hərtərəfli təhlili aparmaq lazımdır. Mikroorqanizmlərin patogen qruplarını öyrənərkən bilmək vacibdirantibiotiklər nə qədər təsirlidir.
Bu, bakterioloji tədqiqat metodunun ümumi xarakteristikası idi.
Təhlilin xüsusiyyətləri
Bakterioloji tədqiqatın əsas qaydası maksimum sterillikdir. Sınaq boruları ilə işləyirsinizsə, bakteriyaların kulturaları və təkrar kulturaları yalnız qızdırılan spirt lampası üzərində aparılmalıdır.
Bakterioloji tədqiqat metodunun bütün mərhələləri xüsusi ilmənin və ya Pasteur pipetinin istifadəsini tələb edir. Hər iki alət spirt lampasının alovunda əvvəlcədən müalicə edilməlidir. Pasteur pipetinə gəlincə, burada termal sterilizasiyadan əvvəl pipetin ucunu cımbızla qırmaq lazımdır.
Bakteriyaların əkilməsi texnikasının da öz xüsusiyyətləri var. Birincisi, bərk mühitə peyvənd edilərkən, agarın səthindən bakterial ilmə keçir. Döngə, əlbəttə ki, artıq səthdə mikroorqanizmlərin nümunəsinə sahib olmalıdır. Mədəniyyət mühitinə peyvənd də tətbiq olunur, bu halda ilmə və ya pipet Petri qabının dibinə çatmalıdır.
Maye mühitlə işləyərkən sınaq borularından istifadə edilir. Burada mayelərin laboratoriya şüşə qablarının və ya tıxacların kənarlarına toxunmamasını, istifadə olunan alətlərin (pipet, ilmə) yad obyektlərə və səthlərə toxunmamasını təmin etmək vacibdir.
Bioloji tədqiqat metodunun əhəmiyyəti
Bakteriya nümunə analizinin praktiki tətbiqləri var. İlk növbədətibbdə bakterioloji tədqiqat metodundan istifadə oluna bilər. Məsələn, düzgün diaqnoz qoymaq, həmçinin düzgün müalicə kursunu hazırlamaq üçün xəstənin mikroflorasını öyrənmək lazımdır. Burada patogenə qarşı dərmanların aktivliyini göstərən antibioqram kömək edir.
Bakteriyaların analizi laboratoriyada vərəm, təkrarlanan qızdırma və ya süzənək kimi təhlükəli xəstəliklərin aşkarlanması üçün istifadə olunur. O, həmçinin badamcıqların, orqan boşluqlarının bakterial tərkibini öyrənmək üçün istifadə olunur.
Mühitin çirklənməsini müəyyən etmək üçün bakterioloji tədqiqat metodundan istifadə etmək olar. Obyektin səthindən yaxmanın kəmiyyət və keyfiyyət tərkibinə dair məlumatlara əsasən bu mühitin mikroorqanizmlər tərəfindən populyasiya dərəcəsi müəyyən edilir.
