Demək olar ki, bütün infeksion xəstəliklərin laborator diaqnostikası xəstənin qanında törədicinin antigenlərinə qarşı əmələ gələn anticisimlərin seroloji reaksiya üsulları ilə aşkarlanmasına əsaslanır. Onlar tibbi təcrübəyə on doqquzuncu əsrin sonundan XX əsrin əvvəllərinə kimi daxil olublar.
Elmin inkişafı mikrobların antigen quruluşunu və onların toksinlərinin kimyəvi formullarını müəyyən etməyə kömək etdi. Bu, təkcə müalicəvi deyil, həm də diaqnostik zərdablar yaratmağa imkan verdi. Onlar laboratoriya heyvanlarına zəifləmiş patogenlərin tətbiqi ilə əldə edilir. Bir neçə gün məruz qaldıqdan sonra dovşanların və ya siçanların qanı seroloji testlərdən istifadə etməklə mikrobları və ya onların toksinlərini müəyyən etmək üçün istifadə olunan preparatları hazırlamaq üçün istifadə olunur.
Belə reaksiyanın xarici təzahürü onun yaranma şəraitindən və xəstənin qanındakı antigenlərin vəziyyətindən asılıdır. Mikrob hissəcikləri həll olunmursa, zərdabda çökür, parçalanır, bağlanır və ya hərəkətsizləşir. Əgər antigenlər həll olunursa, o zaman neytrallaşma və ya çökmə fenomeni görünür.
Aqqlütinasiya reaksiyası (RA)
Seroloji aglütinasiya testi yüksək spesifikdir. İcra etmək asandır və kifayət qədərdirvizual, xəstənin qan serumunda antigenlərin varlığını tez bir zamanda müəyyən etmək. O, Vidal reaksiyasını (tif və paratif qızdırmasının diaqnostikası) və Weigl (tif qızdırması) yoxlamaq üçün istifadə olunur.
İnsan antikorları (və ya aqqlütininlər) və mikrob hüceyrələri (aqqlutenogenlər) arasında xüsusi qarşılıqlı təsirə əsaslanır. Onların qarşılıqlı təsirindən sonra çökən hissəciklər əmələ gəlir. Bu müsbət əlamətdir. Canlı və ya öldürülmüş mikrob agentləri, göbələklər, protozoa, qan hüceyrələri və somatik hüceyrələr reaksiyanı qurmaq üçün istifadə edilə bilər.
Kimyəvi cəhətdən reaksiya iki mərhələyə bölünür:
- Antikorların (AT) antigenlərlə (AG) spesifik əlaqəsi.
- Qeyri-spesifik - AG-AT konqlomeratlarının çökməsi, yəni aglütinatın əmələ gəlməsi.
Dolaylı Aqqlütinasiya Reaksiyası (IPHA)
Bu reaksiya əvvəlkindən daha həssasdır. Bakteriyalar, hüceyrədaxili parazitlər və protozoaların yaratdığı xəstəliklərin diaqnostikasında istifadə olunur. O qədər spesifikdir ki, hətta çox aşağı konsentrasiyalarda antikor aşkar edilə bilər.
Təmizlənmiş qoyun eritrositləri və anticisimlər və ya antigenlərlə əvvəlcədən müalicə edilmiş insan qırmızı qan hüceyrələri onun istehsalı üçün istifadə olunur (laboratorun nə tapmaq istədiyindən asılı olaraq). Bəzi hallarda insan qırmızı qan hüceyrələri immunoglobulinlərlə müalicə olunur. Eritrositlərin seroloji reaksiyaları borunun dibində yerləşdiyi halda baş vermiş hesab olunur. Müsbət reaksiya haqqındahüceyrələrin bütün dibini tutan ters çevrilmiş çətir şəklində düzüldüyünü söyləyin. Eritrositlər sütunda və ya alt hissənin ortasında düymə şəklində yerləşibsə, mənfi reaksiya sayılır.
Yağışma reaksiyası (RP)
Bu tip seroloji reaksiyalar antigenlərin son dərəcə kiçik hissəciklərini aşkar etmək üçün istifadə olunur. Bunlar, məsələn, zülallar (və ya onların hissələri), zülalların lipidlər və ya karbohidratlarla birləşmələri, bakteriyaların hissələri, onların toksinləri ola bilər.
Reaksiya üçün sera heyvanları, adətən dovşanları süni yolla yoluxdurmaqla əldə edilir. Bu üsulla siz tamamilə hər hansı bir çökdürən serum əldə edə bilərsiniz. Seroloji çökmə reaksiyalarının meydana gəlməsi təsir mexanizminə görə aglütinasiya reaksiyalarına bənzəyir. Serumda olan antikorlar kolloid məhlulda antigenlərlə birləşərək borunun dibində və ya substratda (gel) yığılmış böyük protein molekullarını əmələ gətirir. Bu üsul yüksək spesifik hesab olunur və hətta cüzi miqdarda maddəni aşkar edə bilir.
Taun, tulyaremiya, qarayara, meningit və digər xəstəliklərin diaqnostikasında istifadə olunur. Bundan əlavə, o, məhkəmə-tibbi ekspertizasına cəlb olunub.
Gelin çökmə reaksiyası
Seroloji reaksiyalar təkcə maye mühitdə deyil, həm də agar gelində aparıla bilər. Buna diffuz yağış üsulu deyilir. Onun köməyi ilə kompleks antigen qarışıqların tərkibi öyrənilir. Bu üsul antigenlərin antikorlara və əksinə kemotaksisinə əsaslanır. Bir geldə hərəkət edirlərmüxtəlif sürətlə bir-birinə doğru irəliləyir və birləşərək yağıntı xətləri əmələ gətirir. Hər sətir bir AG-AT dəstidir.
Antitoksin (PH) ilə ekzotoksin neytrallaşdırma reaksiyası
Antitoksik serumlar mikroorqanizmlər tərəfindən istehsal olunan ekzotoksinin təsirini neytrallaşdırmağa qadirdir. Bu seroloji reaksiyalar buna əsaslanır. Mikrobiologiya bu üsulla zərdabları, toksinləri və toksoidləri titr etmək və onların müalicəvi aktivliyini təyin etmək üçün istifadə edir. Toksinin zərərsizləşdirilməsinin gücü şərti vahidlərlə müəyyən edilir - AE.
Bundan əlavə, bu reaksiya sayəsində ekzotoksinin növünü və ya növünü təyin etmək mümkündür. Bu tetanoz, difteriya, botulizm diaqnozunda istifadə olunur. Tədqiqat həm “şüşə üzərində”, həm də geldə aparıla bilər.
Lizis reaksiyası (RL)
Xəstənin orqanizminə daxil olan immun zərdab, əsas funksiyası passiv immunitet olmaqla yanaşı, həm də lizinq xüsusiyyətinə malikdir. Xəstənin bədəninə daxil olan mikrob agentlərini, hüceyrə xarici elementlərini və virusları həll etməyə qadirdir. Seruma daxil olan antikorların spesifikliyindən asılı olaraq bakteriolizinlər, sitolizinlər, spiroketolizinlər, hemolizinlər və başqaları təcrid olunur.
Bu spesifik antikorlara "tamamlayıcı" deyilir. O, demək olar ki, bütün insan bədəninin mayelərində olur, mürəkkəb zülal quruluşuna malikdir və temperaturun yüksəlməsinə, sarsıntıya, turşulara və birbaşa günəş işığına son dərəcə həssasdır. Ancaq qurudulmuş vəziyyətdə saxlamağa qadirdir altı aya qədər lizinq xüsusiyyətləri.
Bu tip seroloji reaksiyaların bu növləri var:
- bakterioliz;
- hemoliz.
Bakterioliz xəstənin qan zərdabından və canlı mikroblarla spesifik immun serumundan istifadə etməklə həyata keçirilir. Əgər qanda kifayət qədər komplement varsa, tədqiqatçı bakteriyaların parçalandığını görəcək və reaksiya müsbət hesab olunacaq.
Qanın ikinci seroloji reaksiyası ondan ibarətdir ki, xəstənin qırmızı qan hüceyrələrinin bir suspenziyası yalnız müəyyən bir kompliment olduqda aktivləşən hemolizinləri olan serum ilə müalicə olunur. Əgər varsa, laborant qırmızı qan hüceyrələrinin əriməsini müşahidə edir. Bu reaksiya müasir tibbdə qan zərdabında komplement titrini (yəni eritrositlərin lizisini təhrik edən ən kiçik miqdarını) təyin etmək və komplementin fiksasiyası üçün analiz aparmaq üçün geniş istifadə olunur. Məhz bu şəkildə sifilis üçün seroloji test aparılır - Wasserman reaksiyası.
Tamamlayıcı fiksasiya reaksiyası (CFR)
Bu reaksiya xəstənin qan zərdabında yoluxucu agentə qarşı anticisimləri aşkar etmək, həmçinin patogeni onun antigenik strukturuna görə müəyyən etmək üçün istifadə olunur.
Bu nöqtəyə qədər biz sadə seroloji reaksiyaları təsvir etdik. RSK kompleks reaksiya hesab olunur, çünki orada iki deyil, üç element qarşılıqlı təsir göstərir: antikor, antigen və komplement. Onun mahiyyəti ondan ibarətdir ki, antikor və antigen arasında qarşılıqlı təsiryalnız əmələ gələn AG-AT kompleksinin səthində adsorbsiya olunan komplement zülallarının iştirakı ilə baş verir.
Antigenlərin özləri, komplement əlavə edildikdən sonra, reaksiyanın keyfiyyətini göstərən əhəmiyyətli dəyişikliklərə məruz qalırlar. Bu, lizis, hemoliz, immobilizasiya, bakterisid və ya bakteriostatik təsir ola bilər.
Reaksiya özü iki mərhələdə baş verir:
- Müayinəçiyə vizual olaraq görünməyən antigen-antikor kompleksinin əmələ gəlməsi.
- Komplementin təsiri altında antigendə dəyişiklik. Bu mərhələni ən çox çılpaq gözlə izləmək olar. Əgər reaksiya vizual olaraq görünmürsə, dəyişiklikləri müəyyən etmək üçün əlavə göstərici sistemindən istifadə edilir.
Göstərici sistemi
Bu reaksiya komplement fiksasiyasına əsaslanır. Təmizlənmiş qoç eritrositləri və komplementsiz hemolitik zərdab RSC təyin edildikdən bir saat sonra sınaq borusuna əlavə edilir. Əgər sınaq borusunda bağlanmamış tamamlayıcı qalsa, o zaman qoyun qan hüceyrələri ilə hemolizin arasında əmələ gələn AG-AT kompleksinə qoşularaq onların əriməsinə səbəb olacaqdır. Bu, RSK-nın mənfi olduğu anlamına gələcək. Əgər eritrositlər bütöv qalsa, buna uyğun olaraq reaksiya müsbətdir.
Hemaqqlütinasiya testi (RGA)
İki prinsipcə fərqli hemaqlütinasiya reaksiyası var. Onlardan biri serolojidir, qan qruplarını təyin etmək üçün istifadə olunur. Bu halda qırmızı qan hüceyrələri antikorlarla qarşılıqlı əlaqəyə girir.
Və ikincireaksiya seroloji üçün tətbiq edilmir, çünki qırmızı qan hüceyrələri viruslar tərəfindən istehsal olunan hemaqlütininlərlə reaksiya verir. Hər bir patogen yalnız spesifik eritrositlərə (toyuq, quzu, meymun) təsir etdiyi üçün bu reaksiya yüksək spesifik hesab edilə bilər.
Sınaq borusunun altındakı qan hüceyrələrinin yeri ilə reaksiyanın müsbət və ya mənfi olduğunu müəyyən edə bilərsiniz. Onların nümunəsi tərs çətirə bənzəyirsə, o zaman xəstənin qanında istənilən virus mövcuddur. Və əgər bütün eritrositlər sikkə sütunu kimi formalaşıbsa, o zaman arzu olunan patogenlər yoxdur.
Hemaqqlütinasiya inhibə testi (HITA)
Bu, virusların növünü, növünü və ya xəstənin qan zərdabında spesifik antikorların mövcudluğunu müəyyən etməyə imkan verən yüksək spesifik reaksiyadır.
Onun mahiyyəti ondan ibarətdir ki, sınaq materialı ilə birlikdə sınaq borusuna əlavə edilən antikorlar eritrositlərin üzərində antigenlərin çökməsinin qarşısını alır və bununla da hemaqlütinasiyanı dayandırır. Bu, axtarılan spesifik virus üçün xüsusi antigenlərin qanda olmasının keyfiyyət əlamətidir.
İmmunofluoressensiya reaksiyası (RIF)
Reaksiya AG-AT komplekslərini flüoroxrom boyalarla müalicə edildikdən sonra flüoresan mikroskopiya ilə aşkar etmək qabiliyyətinə əsaslanır. Bu üsulu idarə etmək asandır, təmiz mədəniyyətin təcrid olunmasını tələb etmir və az vaxt tələb edir. Yoluxucu xəstəliklərin sürətli diaqnostikası üçün əvəzolunmazdır.
Təcrübədə bu seroloji reaksiyalar iki növə bölünür: birbaşa və dolayı.
Direct RIF-dən istehsal olunurfloresan serum ilə əvvəlcədən müalicə olunan antigen. Dolayısı isə ondan ibarətdir ki, əvvəlcə preparat maraq doğuran anticisimlər üçün antigenləri olan adi diaqnostikumla müalicə olunur, sonra isə AG-AT kompleksinin zülalları üçün spesifik olan lüminessent zərdab yenidən tətbiq olunur və mikrob hüceyrələri mikroskop altında görünən olur.
